冻干荧光PCR试剂冻干方法是将荧光PCR试剂经过预冻,在真空状态下进行升华,后可制备成冻干粉。冻干荧光PCR试剂时,选用的反应管在做冻干时有许多不足之处:1.由于反应管呈上宽下窄的锥字形,还需要借助其他工具支撑,这样反应管试剂与冻干机搁板的接触面积很小,升华时传热会受到限制,延长了预冻和升华的时间,反应管中的冻干程序一般在24~30小时,冻干制品日产量很低。2.反应管中的冻干,在加入冻干混合试剂后,需要进行离心处理,排出气泡,并将粘附在反应管壁上的试剂离心下来。3.反应管中的冻干,在冻干结束后需要关盖,或者是开模具做带豁口的反应管(排盖)或者是冻干结束后自动压盖,冻干结束后将反应管取出,在冻干机外部关盖,这种方法对环境有很高的要求,需要恒温恒湿,湿度不能超过15%。适合冻干荧光PCR的试剂冻干机Pilot10-15T应用示例:
1.探针、底物、引物原料要求确定。
2.冻干溶液配方开发,采用正交法或响应曲面法进行辅料筛选。
3.选择适合的包材和模具。
4.设计冻干曲线配合辅料筛选。
5.确定配方及工艺。
6.稳定性测试。
7.根据稳定性测试结果修正工艺或配方。
8.整个环节注意环境、设备、人员的结合。
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