菌种的分装及冻干过程,菌种分装安瓿时可用灭菌的长滴入安瓿管底部,每管分装量约0.1~0.2毫升,分装安瓿管时间尽量要短,在1-2小时内分装完毕并预冻。分装时应注意在无菌条件下操作。对于细菌制品,预冻过程一般通过“两步法”来完成。先是以慢速进行降温,让细胞外的溶液中产生冰,细胞内的水分通过细胞膜渗向胞外,胞内溶液的浓度逐渐提高;然后是以较高速率进行降温,以实现胞内溶液的玻璃化。菌种预冻1~2小时将冷冻后的样品安瓿管置于冻干机的干燥箱内,冻干机开始冷冻干燥,时间一般为8-20小时。终止干燥时间应根据下列情况判断:①安瓿管内冻干物呈酥块状或松散片状;②真空度接近空载时的较高值;③选用1-2支对照管,其水份与菌悬液同量,视为干燥完结。
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